产品货号:
YT471
中文名称:
C端His标签融合蛋白质粒
英文名称:
C-His plasmid(with CMV promoter)
产品规格:
1μg|100μg
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本质粒是用于在哺乳动物细胞中表达C端和His tag(His标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达;在多克隆位点的5'端含有一个可以编码His标签的序列,因此可以表达出含有His标签的融合蛋白,可以方便地使用抗His的抗体来识别目的蛋白,有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
保存:-20℃
pCMV-C-His质粒的主要信息如下::
pCMV-C-His质粒中对于插入片段进行测序时,推荐使用的正向测序引物T3和反向测序引物T7的序列如下:
T3 primer(620-639):5′AATTAACCCTCACTAAAGGG 3′
T7 primer(811-832):5′GTAATACGACTCACTATAGGGC 3′
相关搜索:C端His标签融合蛋白质粒,pCMV-C-His,C-His plasmid(with CMV promoter)
组分 | 1μg | 100μg |
pCMV-C-His | 1μg | 100μg |
说明书 | 1份 | 1份 |
保存:-20℃
pCMV-C-His质粒的主要信息如下::
Feature Nucleotide | Position |
CMV promoter | 1-602 |
T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
multiple cloning site | 680-740 |
c-His tag | 741-758 |
T7 promoter and T7 primer binding site | 811-832 |
SV40 polyA signal | 844-1227 |
f1 origin of ss-DNA replication | 1365-1669 |
bla promoter | 1694-1818 |
SV40 promoter | 1838-2176 |
neomycin/kanamycin resistance ORF | 2211-3002 |
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3003-3461 |
pUC origin | 3590-4257 |
- pCMV-C-His中没有的酶切位点包括:
Afl II Age I Ahd I Asc I Bbs I Bbv II Blp I Bsg I BsiW I BsmB I BspM II BsrG I BssH II Bst1107 I BstE II Ear I Eco47 III Eco72 I EcoN I Esp I Fse I Nru I PflM I Pme I Pml I PpuM I Psp1406 I Sap I Sca I Spe I - pCMV-C-His中的单酶切位点包括:
Nde I CA`TA,TG 241 Pvu I CG,AT`CG 845 SnaB I TAC|GTA 347 Bcl I T`GATC,A 999 Nhe I G`CTAG,C 598 Mun I C`AATT,G 1092 Sac I G,AGCT`C 656 Hpa I GTT|AAC 1105 Sac II CC,GC`GG 663 Mlu I A`CGCG,T 1228 BstX I CCAN,NNNN`NTGG 664 Dra III CAC,NNN`GTG 1458 Not I GC`GGCC,GC 669 Sfi I GGCCN,NNN`NGGCC 2115 PspA I C`CCGG,G 681 BseR I GAGGAG 16/14 2158 Xma I C`CCGG,G 681 Stu I AGG|CCT 2161 Srf I GCCC|GGGC 683 Cla I AT`CG,AT 2180 Sma I CCC|GGG 683 Kas I G`GCGC,C 2339 BamH I G`GATC,C 688 Nar I GG`CG,CC 2340 Hind III A`AGCT,T 694 Ehe I GGC|GCC 2341 Pst I C,TGCA`G 704 Bbe I G,GCGC`C 2343 EcoR I G`AATT,C 706 Msc I TGG|CCA 2422 EcoR V GAT|ATC 714 Tth111 I GACN`N,NGTC 2458 Sal I G`TCGA,C 718 BsrD I GCAATG,8 2573 Acc I GT`MK,AC 719 Bsp1286 I G,DGCH`C 2643 Bgl II A`GATC,T 724 Rsr II CG`GWC,CG 2856 PaeR7 I C`TCGA,G 730 BsiC I TT`CG,AA 3022 Xho I C`TCGA,G 730 BstB I TT`CG,AA 3022 Xba I T`CTAG,A 736 Bsa I GGTCTC 7/11 3329 Bsp120 I G`GGCC,C 763 HgiE II ACCNNNNNNGGT-1/13 3669 Apa I G,GGCC`C 767 ApaL I G`TGCA,C 3944
pCMV-C-His质粒中对于插入片段进行测序时,推荐使用的正向测序引物T3和反向测序引物T7的序列如下:
T3 primer(620-639):5′AATTAACCCTCACTAAAGGG 3′
T7 primer(811-832):5′GTAATACGACTCACTATAGGGC 3′
- 首次使用1μg包装的本产品时,请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
- 100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl,共1mL。可以直接用于酶切或者转染细胞。
- pCMV-C-His质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,需注意插入基因片段和tag之间的读码框要一致,即需要避免发生移码突变。构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
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